产品货号：
RFT080
中文名称：
1×Western湿法转膜缓冲液
英文名称：
产品规格：
10×1L
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
1×Western湿法转膜缓冲液可以用于Western时湿转转膜，原始配方是1×Towbin buffer:25mM Tris、192mM glycine、10～20%甲醇、0.01～0.1% SDS、pH~8.3。为方便客户使用，本制品中没有添加甲醇和SDS，客户根据需要配制1×转膜缓冲液时自行添加。
| 组分 | 规格 |
| 1×Western湿法转膜缓冲液 | 10×1L |
| 说明书 | 1份 |
保存：室温，有效期2年。
1×即用型转膜缓冲液配制方法(1L)：
| 成分 | 用量/终浓度 | ||
| 1×Western湿法转膜缓冲液 | 1袋 | ||
| 超纯水 | 约600mL | ||
| ＜20kD蛋白 | 无水甲醇 | 20% | 5～10% |
| SDS | 0.01% | 0.01% | |
| 20～80kD蛋白 | 无水甲醇 | 10% | 0～5% |
| SDS | 0.05% | 0.05% | |
| ＞80kD蛋白 | 无水甲醇 | 10%（NC膜） 0～5%（PVDF膜） | 0% |
| SDS | 0.1% | 0.1% | |
| 超纯水 | 至1L | ||
- 不要调节pH，pH~8.3。
- 1×即用型转膜缓冲液建议现用现配，不建议保存。
- 甲醇和SDS在转膜中有拮抗作用。甲醇使蛋白更加结合在膜上，而SDS让蛋白更加离开膜。因此对大蛋白转膜来说，多加SDS，少加甲醇；而对小蛋白转膜，多加甲醇，少加SDS。
- 膜的选择：转膜可以选择PVDF膜或NC膜。根据蛋白大小选择膜的孔径。一般说来，大于20kD蛋白选择0.45μm孔径，低于20kD选择0.22μm孔径。PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿活化。
- 蛋白转膜三明治制作：
负极（电转夹黑色面）-海绵垫-1层1mm厚度滤纸-凝胶-膜-1层1mm厚度滤纸-海绵垫-正极（电转夹白色面）
- 转膜条件：以下转膜条件仅供参考，客户针对自己的目的蛋白，最好经过1～2次预实验后，确定最佳的转膜条件。
膜孔径 蛋白大小 稳流 建议时间 降温措施 0.22μm 低于20kD 200 mA ~30分钟 不需要 0.45μm 20～50kD 300 mA ~45分钟 需要 0.45μm 50～200kD 350 mA ~50分钟 需要 0.45μm 高于200kD 350 mA ~2.5～4.5小时 需要
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